當樣品的進樣量在**范圍內(nèi)時，改變進樣量會相應地影響峰高和峰面積。但保留時間、峰寬和分辨率的影響很小。當注射量或質(zhì)量過大時，會引起過載現(xiàn)象。隨著峰寬的增加，峰形變差和分辨率降低是不可避免的
對于長度為50-250mm，內(nèi)徑為4-5mm的色譜柱，單次進樣的進樣質(zhì)量應小于50μg，進樣體積應小于25μL。過載分為體積過載和質(zhì)量過載兩種，下面將介紹兩種過載對分離的影響。
（1） 體積過載：下圖顯示了分別含有10、40、60、80和100μL的1mg/mL連翹苷的色譜圖。可以看出，10μL的峰型*好，40μL的峰面積*大，隨著進樣量的增加，峰型越明顯。
（2） 質(zhì)量過載：下圖是氨基酸及其衍生物的測定，顯示了正常和超大質(zhì)量條件下的峰形狀。
過載會影響色譜峰的形狀，只有當樣品的體積和質(zhì)量在合適的范圍內(nèi)時，才能得到良好的峰形狀?，F(xiàn)在，我們將繼續(xù)討論哪些因素會導致領(lǐng) 先區(qū)域或落后區(qū)域。
領(lǐng) 先區(qū)域：（拖尾系數(shù)<0.95）
1.溶劑效應的影響
（1） 用流動相溶解樣品：（姜黃素標準品）
（2） 首先用強溶劑溶解樣品，然后用流動相稀釋：（石杉堿標準）
2.緩沖作用不當：（注射苦參堿）
3.儀表系統(tǒng)不正確
在傳統(tǒng)液相色譜儀上使用Ultisil®XB-C18柱（4.6×50mm，1.8μm）時，其峰形將受到系統(tǒng)大死體積的影響。
拖尾面積：（拖尾因子<0.95）
1.降低pH值并抑制二氧化硅羥基的電離。
2.增加緩沖鹽，提高緩沖效果
3.由于每種緩沖鹽的緩沖容量不同，可以通過改變緩沖鹽來調(diào)整
4.屏蔽二氧化硅的影響（如添加三乙胺）
在我們的定性和定量檢測分析中，峰的形狀對我們的實驗結(jié)果有很大的影響，因此確保良好的峰形狀是我們實驗成功的關(guān)鍵，而異常峰形狀的檢測和解決當然是我們實驗分析的一項重要技能。
